据南京巴傲得生物科技有限公司2013年10月30日9:40最新数据分析:抗体定制表面修饰脂质体分析方法?由南京巴傲得专家来为您总结。巴傲得生物科技有限公司是专业从事专业IHC试剂盒、质粒构建、最先进的蛋白表达、抗体定制表面修饰脂质体、proteinA产品。等生命科学研究的专业技术型企业。从事生物技术产品的开发及销售,致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。咨询热线:025-68037686
protein在凝胶里边是不暴露在外的,而是在凝胶内的。你要是切过DNA胶,你就能明白。所以要transfer到membrane上以使其暴露于抗体;一抗制备,比方说兔子吧,你先给兔子喂一些你想要probe的蛋白,兔子就对这外源蛋白起免疫反应了,就产生抗体了。然后你让兔子流血,从血里边提取抗体。这个就叫一抗。这个一抗是和你要probe的蛋白特异性结合的,没错吧。但是你怎样用你自己的眼睛来看这个特异性识别呢("显色")。这就需要二抗了。二抗就能和一抗特异性结合(一般要是兔子产的一抗,就用anti-兔子的二抗;老鼠的就用老鼠的。)为啥二抗能显色,take home for you, 就是想想为啥二抗会显色^^; 总之,一抗是和靶蛋白特异性结合;二抗和一抗结合以此来显色。
单克隆抗体的优点与局限性:单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性,只有对它们有全面的了解,才能根据不同应用领域的要求,正确的选择和应用。
1)单克隆抗体的优点:
(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
2)单克隆抗体的局限性:
(1)单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。、
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
(3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高。
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