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深圳科软KR仿手工甩干式离心式洗板机之ELISA的主要试剂:固相载体

来源:www.97506.com 发布于:2014年01月27日 01:45:27

可作ELISA中载体的物质很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。在E L I S A测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应。加之它的价格低廉,所以被普遍采用。

       科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言,其最大特点是:1、不用人工拍板;2、不会堵针;3、故障低;4速度快。

       不吸液:删除吸液针等吸液系统,利用旋转和重力去液。

       无污染:水平放板,旋转向下甩液,保证最大程度去液。独特锅底状接液设计,极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板:微孔内无残留,洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔:无吸液针,极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理,实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗,避免结晶堵塞。开关机自动维护,保证管路内畅通无阻。

       不撞针:注液针不移动,与微孔板保持足够距离,有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗:每块板可以任选条数进行清洗,节省洗液,保护环境。

       速度快:一次可洗16块板,KR306洗好6块板约4分钟。

     可作ELISA中载体的物质很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。在E L I S A测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应。加之它的价格低廉,所以被普遍采用。
    ELISA载体的形状主要有三种:小试管、小珠和微量反应板。小试管的特点是还能兼作反应的容器,最后放人分光光度计中比色。小珠一般为直径0.6 c m 的圆球,表面经磨砂处理后吸附面积大大增加。如用特殊的洗涤器,在洗涤过程中使圆珠滚动淋洗,效果更好。最常用的载体为微量反应板,专用于E L I S A测定的产品也称为E L I S A板,国际通用的标准板形是8 X 1 2 的9 6孔式。为便于作少量标本的检测,有制成8 联或1 2联孔条的,放入座架后,大小与标准E L I S A板相同。E L I S A板的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特定的比色计上迅速读出结果。现在巳有多种自动化仪器用于微量反应板型的E L I S A检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化极为有利。
      良好的E L I S A板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯E L I S A板由于配料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大。因此每一批号的聚苯乙烯制品在使用前须检查其性能。常用的检査方法为:以一定浓度的人IgG(—般为10 n g / m L )包被E L I S A板各孔后,每孔内加入适当稀释的酶标抗人I g G抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各读数在0 . 8左右。计算所有读数的平均值。

     所有单个读数与平均读数之差应小与聚苯乙烯类似的塑料为聚氯乙烯。作为E L I S A 固相载体,聚氯乙烯板的特点为质软板薄,可切割,价廉,但光洁度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。为比较不同固相在某一 E L I S A测定中的优劣,可用以下方法加以检验:用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。将它们分别进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的E L I S A操作步骤进行测定,然后比较测定结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果差别最大,这种载体就是这一 E L I S A测定的最合适的固相载体。除塑料制品外,固相酶免疫测定的载体还有两种材料:一是微孔滤膜,如:硝酸纤维素膜、尼龙膜等,这类测定形式已在本章第三节“膜载体的酶免疫测定”中介绍。另一种载体是以含铁的磁性微粒制作的,反应时固相微粒悬浮在溶液中,具有液相反应的速率,反应结束后用磁铁吸引作为分离的手段,洗涤也十分方便,但需配备特殊的仪器。

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