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深圳科软KR仿手工甩干式离心式洗板机之ELISA检测中的洗涤方式有哪些

来源:www.97506.com 发布于:2014年01月24日 01:00:24

洗涤在E L I S A过程中虽不是一个反应步骤,却决定着实验的成败,E L I S A反应就是靠洗涤来达到将游离和结合酶标记物分离的目的,通过洗涤来清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。

       科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言,其最大特点是:1、不用人工拍板;2、不会堵针;3、故障低;4速度快。

       不吸液:删除吸液针等吸液系统,利用旋转和重力去液。

       无污染:水平放板,旋转向下甩液,保证最大程度去液。独特锅底状接液设计,极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板:微孔内无残留,洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔:无吸液针,极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理,实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗,避免结晶堵塞。开关机自动维护,保证管路内畅通无阻。

       不撞针:注液针不移动,与微孔板保持足够距离,有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗:每块板可以任选条数进行清洗,节省洗液,保护环境。

       速度快:一次可洗16块板,KR306洗好6块板约4分钟。

     洗涤在E L I S A过程中虽不是一个反应步骤,却决定着实验的成败,E L I S A反应就是靠洗涤来达到将游离和结合酶标记物分离的目的,通过洗涤来清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在E L I S A操作中,洗涤是最主要的关键技术,每一次清洗都必须谨慎进行,操作者应严格按要求洗涤,清洗方式基本上有手工清洗和洗板机自动清洗两种。手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,一般操作过程如下:
(一)浸泡式
      ①吸干或甩干孔内反应液。
      ②用洗涤液洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去)。
      ③ 浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1 m i n〜2 m i n,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短。
      ④吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水栗或真空栗抽吸,也可用去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干。 
      ⑤重复操作③和④,洗涤3〜4 次(或按说明规定)。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。洗涤液中的
非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0. 0 5 % 〜0. 2 % 之间,高于0. 2 % 时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而降低试验的灵敏度。
(二)流水冲洗式
     流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2 m i n后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2 m i n ,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
(三)洗板机自动清洗
     在使用自动洗板机时,应确保全部板孔己完全抽吸,以便在每一个清洗周期注入的清洗液可以达到每一个板孔的边缘。设定洗板可按试剂盒要求洗3 个〜5 个清洗周期。

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