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深圳科软KR仿手工甩干式侧立式洗板机之ELISA检测中的操作注意事项

来源:www.97506.com 发布于:2014年01月30日 01:30:30

⑦在使用中不要让微孔干燥,否则会伴随着出现标准曲线不成线性、重复性不好的现象。洗板拍干后应立即进行下一步操作。

       科软仿手工甩干式全自动洗板机是传统洗板机和传统甩干机的有机组合的一体机。相对传统洗板机而言,其最大特点是:1、不用人工拍板;2、不会堵针;3、故障低;4速度快。

       不吸液:删除吸液针等吸液系统,利用旋转和重力去液。

       无污染:水平放板,旋转向下甩液,保证最大程度去液。独特锅底状接液设计,极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。

       免拍板:微孔内无残留,洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。

       不堵孔:无吸液针,极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理,实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗,避免结晶堵塞。开关机自动维护,保证管路内畅通无阻。

       不撞针:注液针不移动,与微孔板保持足够距离,有效保护酶标板和孔内包被。

       可条洗:每块板可以任选条数进行清洗,节省洗液,保护环境。

       速度快:一次可洗16块板,KR306洗好6块板约4分钟。

          ① 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或B S A 等封闭。
        ② 在E L I S A 中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
         a ) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
         b ) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求p H 在9. 0〜9. 6 之间。吸附温度、时间及其蛋白质的量也有一定影响, 一般多采用4 °C、18 h〜24 h。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0. 1 M g / m L、1. 0 叩/ m L 和10 f x g / m L等)进行包被后,在其他试验条件相同时,观察阳性标本的O D 值。选择O D 值最大而蛋白质的量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1 fig/mL〜10 jug/mL。
         c )酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接E L I S A法进行初步效价的滴定。然后再固定其他条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
         d ) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如O P D 等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如T M B 和A B T S 是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10 m i n〜30 m i n为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是h 2o 2在临用前加人。
         ③反应终止液多为硫酸,应避免接触皮肤。
         ④不要使用超过有效日期的试剂盒,不要交换使用不同批号的盒中试剂,稀释或掺杂使用会引起灵敏度、O D 值的降低。
         ⑤使用之前将所有试剂回升至室温20 °C〜25 ° C,在室温20 °C〜25 °C条件下操作。室温低于20 °C或试剂及标本没有回到室温(20 °C〜25 °C)会导致所有标准的O D 值偏低。
        ⑥使用之后立即将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封放回2 V 〜8 ° C,不要冷冻。
        ⑦在使用中不要让微孔干燥,否则会伴随着出现标准曲线不成线性、重复性不好的现象。洗板拍干后应立即进行下一步操作。
        ⑧在酶联免疫分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性,仔细按照推荐的洗板顺序操作是酶联免疫分析测定程序中的要点。
        ⑨在所有恒温温育过程中,应避免光线照射,用盖子盖住微孔板。
        ⑩显色液对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下,显色液自身有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。
        ⑪ 0 标准的吸光度值小于0. 6 个单位( A 45()„m < 0 . 6)时,表示试剂可能变质。
        ⑫实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
       实验之前须检查各种实验器具是否干净,必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实验结果。

 

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