不吸液:删除吸液针等吸液系统,利用旋转和重力去液。
无污染:水平放板,旋转向下甩液,保证最大程度去液。独特锅底状接液设计,极难反溅。独有的防污染预处理洗板程序。
免拍板:微孔内无残留,洗好后不用人工拍板。免除拍板给环境和使用者造成的不利影响。
不堵孔:无吸液针,极大地降低堵孔风险。注液针防堵孔处理,实现注液针不堵孔。闲时管路自动清洗,避免结晶堵塞。开关机自动维护,保证管路内畅通无阻。
不撞针:注液针不移动,与微孔板保持足够距离,有效保护酶标板和孔内包被。
可条洗:每块板可以任选条数进行清洗,节省洗液,保护环境。
速度快:一次可洗1—6块板,KR306洗好6块板约4分钟。
六、食物中组织胺过敏原的测定组织胺(histamin)是由一些细菌在诸如鱼、奶酪、葡萄酒等富含蛋白质的食物中生长时引起组织氨分解的产物。R I D A S C R E E N ® Histamin竞争性E L I S A是一种改良的试剂盒,可进行4 8次测试,测试完成的时间约需90 min。样品的制备包含一个酰化作用,之后,在竞争性E L I S A中,被酰化的组织胺会被测定。
(一)试剂盒中的试剂和仪器
1. 用于样品酰化的试剂和仪器
①酰化平皿。
②组织胺标准品(0 /ig/kg,0. 5 fig/kg, 1. 5 ^g/kg,5 f^g/kg, 15 yg/kg 和 50 fxg/kg)。
③酰化试剂。
④酰化稀释剂。
2. 用于酶免疫测定的试剂和仪器
①包被组织胺的4 8孔微量滴定板。
② 结合试剂。
③抗组胺抗体。
④ 底物/色原体。
⑤ 停止液。
⑥冲洗缓冲液。
(二)样品制备
①试剂盒巳列出可以检测的样品制备种类,如:鱼、鱼粉、奶酪、奶、酒等。
②勻化稀释样品后,样品和标准物分别在酰化平皿中酰化,酰化时间只需15 min。
③ 将0. 025 m L 酰化样品转移至E L I S A板中,E L I S A测试过程即开始。
(三)E L I S A测试步骤
①在微孔支架上插人足够数目的微孔。
② 添加25 fxL酰化标准溶液,将配制好的样品加人分离孔中。
③ 加100 p L 抗组织胺抗体至每个孔中,轻轻混合,于室温下培养40 min。
④从孔中弃去液体,将250 (JiL冲洗缓冲液装人孔中,再弃去液体,重复多次。
⑤ 加100 结合物至每个孔中,轻轻混合,室温下培养20 min。
⑥ 弃去液体,向孔中加人50 f^L冲洗缓冲液,再弃去,重复多次。
⑦ 加100 y L 底物/色原体溶液至每个孔中,轻轻混合,暗处培养15 min。
⑧ 加100 juL停止液至每个孔中。轻轻混合,在450 n m 下测吸光度值。(四)结果
专门的软件R I D A S O F T w i n可用于评价R I D A S C R E E N E L I S A的分析。对应每个样品吸光度值的组织胺浓度(Mg/kg)可以从标准曲线上读出,然后再乘以相应的稀释因子。
(五)验证
由食品分析水平测试计划(F A P A S )为实验室进行规范的测试,所用的测试材料是随机设定的实物样品。
(六)结论
样品制备要求时间约为15 min,测试完成时间约为90 min。检出限取决于样品(并从100 yg/kg开始),样品回收率在9 5 %〜1 0 9 %之间,结果显示与F A P A S 的参比试样具有良好的一致性。